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將血標本均勻地涂抹在清潔干燥的載玻片上，經(jīng)染色后在顯微鏡下檢查，這是血細胞形態(tài)學檢查的基本方法，臨床應用很廣，特別是對各種血液病的形態(tài)學診斷很有價值。但是，如果血徐片制備不良，染色不佳，常使血細胞的形態(tài)學鑒別和診斷發(fā)生困難，甚至導致錯誤的結論。如血膜過厚，細胞重疊縮?。谎ぬ?，白細胞多集中于邊緣。因此，制備厚薄適宜、分布均勻的血涂片是血液學檢驗的基本技術之一。

一、載玻片的清潔

新載玻片上常有游離堿質，必須用約lmol／LHCI浸泡24h后，再用清水徹底沖洗，干燥備用。用過的載玻片可放入含適量肥皂或合成洗滌劑的清水中煮沸20min，再用熱水將肥皂和血膜洗凈，用清水反復沖洗，干燥備用。如急用載玻片，可將其置0、9乙醇中浸泡lh，用蒸餾水洗凈后，擦干或烘干備用。使用載玻片時，只能手持玻片邊緣，切勿用手觸及玻片表面，以保持玻片清潔、干燥、中性、無油膩。

二、制作血涂片的標本

血涂片既可由非抗凝的靜脈血和毛細血管血制備，也可由EDTA抗凝血制備。EDTA抗凝血中，鈣離子被螫合后，能阻止血小板聚集，推片時血小板均勻平鋪，顯微鏡下易于對血小板進行觀察評價。但有時可觀察到因EDTA引起的紅細胞皺縮及白細胞叢集現(xiàn)象。但隨著血液分析儀的逐步普及，血標本多為EDTA抗凝血，除作全血細細胞計數(shù)及多參數(shù)分析外，制備血涂片也非常方便，雖有上述弊端，但顯微鏡下易于發(fā)現(xiàn)。

三、血涂片的制備

血涂片的制備方法很多，如手工推片法、自動推片法、載（蓋）玻片壓拉法、旋轉涂片法、棕黃層（buffy－coat）涂片法及厚血膜涂片法等，現(xiàn)介紹如下。

1、手工推片法 取血標本一滴置載玻片的一端，以邊緣平滑的推片一端，從血滴前沿方向接觸血液，使血液沿推片散開，推片與載玻片保持25～30o的平面夾角，平穩(wěn)地將血向前推動，血液即在載玻片上形成一薄層血膜。將制成的血膜在空氣中揮動，使迅速干燥，以免血細胞皺縮。

一張良好的涂片，要求厚薄適宜，頭體尾分明，邊緣整齊，兩側應留有空隙。玻片的一端應留有貼標簽的地方。涂片的好壞與血滴大小、推片與載片之間角度、推片時的速度有關。血滴大、角度大、速度快，則血膜厚；反之則血膜薄。血膜分布不勻，主要是推片邊緣不齊、用力不勻或載玻片不清潔所致。

2、載玻片壓拉法 取兩張貼有標簽的載玻片備用，將血液滴于一張載玻片的近中央處，立即將另一載玻片于之貼合，四角對齊，標簽一端一個，使貼合后的玻片間留下如標簽一樣厚的間距。先將血滴沿縱向輕壓展開，再將兩玻片橫向均勻拉開，得到兩張血膜。此法最適用于血細胞的活體染色，預先將染料滴加在玻片上，干燥后備用。涂制時先將血液與染料混染一段時間，再按上述方法制成血涂片，顯微鏡下檢查，如網(wǎng)織紅細胞的檢驗。

3、旋轉器涂片法 旋轉涂片器的基本結構是：在與電動機轉軸垂直的方向裝一水平轉盤，正中夾置載玻片。徐制時將血標本滴加在載玻片的中央，開動旋轉涂片機，在規(guī)定的時間內(nèi)即可制備一張良好的血涂片。對該儀器的要求應具有低慣性高轉矩，開動時能立即加速（5000r／min），關機時能迅速停止（O、25s內(nèi)）。使用這種儀器涂片，白細胞及紅細胞能均勻分布在玻片上，且形態(tài)保持完好。

4、棕黃層涂片法為了獲得較多的有核細胞，使用離心的方法，將EDTA抗凝血作分層離心（RCF—2260g，5min），取紅細胞層上的棕黃層（有核細胞和血小板集中層，）作標本，用手工推制成涂片供檢查用。

5、厚血膜涂片法從指尖或耳垂取血1滴（約20ul）于載玻片中央，用推片的一角將血由內(nèi)向外旋轉涂布，制成厚薄均勻、直徑約1、5cm的圓形血膜，自然干燥后，滴加數(shù)滴蒸餾水，使紅細胞溶解，脫去血紅蛋白。傾去水后血膜呈灰白色，干后染色鏡檢。厚血膜片因取血量多，待檢成分較集中，因此特別適合于瘧原蟲、絲蟲的微絲蚴等的檢查。

（責任編輯：liushengbao）

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