糞便隱血試驗是檢驗技師需要了解的知識，醫(yī)學教育網(wǎng)搜索整理如下：

當上消化道少量出血，紅細胞被破壞，肉眼不見血色，鏡檢不能看到紅細胞，稱為隱血。檢測隱血的試驗方法稱為隱血試驗。

一、方法

（一）鄰-甲苯胺法[原理]血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過氧化物酶活性，能催化過氧化氫放出新生態(tài)的氧，將鄰-甲苯胺氧化為鄰-甲偶氮苯，呈現(xiàn)藍色。

【試劑】

1.鄰-甲苯胺冰乙酸溶液：取AR級鄰-甲苯臘150ml，加冰乙酸至lOOOml.可借用血糖鄰-甲苯胺試劑。

2.1mol/L過氧化氫溶液。

[操作]用竹簽挑取少許糞便于白瓷板、玻片或濾紙上，滴加鄰-甲苯胺冰乙酸溶液2-3滴，再加過氧化氫溶液2-3滴，混勻后立即觀察結果。也可用棉簽涂取少許糞便，然后將鄰-甲苯胺冰乙酸溶液和過氧化氫溶液直接滴加在棉簽上，立即觀察結果。

【結果判斷】

++++：加入試劑后立即出現(xiàn)黑藍色。

+++：加入試劑后立即出現(xiàn)藍褐色。

++：加入試劑后初顯淺藍色，逐漸呈明顯藍褐色。

+：加入試劑lOs后，初顯淺藍色漸變?yōu)樗{色。

-：加入試劑2分鐘后仍不變色。

【注意事項】

1.過氧化氫易分解失效，要經(jīng)常檢查。方法是將其滴加在血膜上，若逐漸產(chǎn)生較多小氣泡表示有效，否則要重新配制。

2.試驗前3天禁食動物血、肉、肝及鐵劑、中藥或生食富含葉綠素食物等，以免引起假陽性；糞便膿汁中的中性粒細胞內(nèi)過氧化物酶也可引起假陽性，可將標本用生理鹽水制成糊狀煮沸2分鐘，冷卻后再進行試驗。

3.維生素C等還原性物質(zhì)可干擾過氧化氫對顯色物的氧化，引起假陰性。

4.用正常糞便或在其中加入少量溶血液制備陰性或陽性質(zhì)控標本，每天與待檢標本平行測定進行質(zhì)控。試驗用具應加熱去除污染的過氧化物酶，避免對試驗的影響。

（二）免疫膠體金試紙法

【原理】

在特制的纖維試紙條上預包被金標記抗人血紅蛋白抗體（Au-Ab1），在檢測線和控制線上分別固定抗人血紅蛋白抗體（Ab2）和針對金標記抗人血虹蛋白抗體的第二抗體（Ab3）。檢測時，若存在人血紅蛋白（Hb），由于滲透作用，將在檢測線處形成“Ab2-Hb——Ab1-Au”夾心結構，同時在控制線處形成“Ai—Ab1-Au”，出現(xiàn)兩條色帶，呈陽性反應；若不存在Hb，則僅在控制線處出現(xiàn)一條色帶。

【操作】 1.取一潔凈干燥載玻片，滴加蒸餾水1-2滴。

2.用竹簽挑取少許糞便，均勻涂抹于蒸餾水中，使成混合液，并讓混合液集中。

3.將糞便隱血檢測試帶的反應端浸入混合液中，5分鐘內(nèi)觀察結果。

【結果判斷】

陽性：控制線和反應線均顯示色帶（即出現(xiàn)兩條色帶）。陰性：僅在控制線出現(xiàn)一條色帶。

無效：不出現(xiàn)色帶或控制線不出現(xiàn)色帶為無效，應重做試驗。

【注意事項】

1.試帶應低溫保存，不能冰凍，用前先復溫。

2.糞便必須多部位多層面采集，尤其對硬質(zhì)糞便。

3.用蒸餾水涂片。試帶浸入時不要超過標記線。

4.若糞便外觀呈柏油樣而試驗為陰性時，可能是由于血紅蛋白過多，出現(xiàn)抗原過剩（前帶現(xiàn)象），此時應將糞便混合液稀釋后再進行檢測。

（三）方法學評價

1.化學法是糞便隱血試驗的傳統(tǒng)方法，按其試劑的組成成分及操作方法分為普通化學法和化學試帶法（將化學試劑組成成分置于試紙條上）。其原理基本相同，都是血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有類似過氧化物酶的作用，催化過氧化物產(chǎn)生新生態(tài)的氧，氧化色原顯色，如鄰。甲苯膠法、鄰聯(lián)甲苯膠法、匹拉米洞法、無色孔雀綠法等。這些方法簡單易行，靈敏度也能滿足臨床要求，但缺乏特異性和準確性，此外化學試劑不穩(wěn)定，久置后可使反應減弱。外源性血紅蛋白、肌紅蛋白、植物性過氧化物酶等均可引起假陽性，食入維生素C或其他具有還原作用的藥物可引起假陰性，因此，要求素食3天后，再收集標本進行試驗。

2.免疫學方法是糞便隱血試驗發(fā)展普及最快的方法。通常采用單克隆或多克隆抗體，針對糞便中的人血紅蛋白或人紅細胞基質(zhì)，用免疫學方法檢測糞便中的隱血，如免疫單擴法、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫斑點法、免疫肢體金夾心法等。免疫學方法操作簡便、快速，特異性好，靈敏度高，因而不需選擇飲食。免疫學糞便隱血試驗方法被認為是目前對大腸癌普查最適用的方法。該類方法主要檢測下消化道出血，上消化道出血有近50%不能檢出，原因是血紅蛋白被消化酶降解變性或消化而失去抗原性、患者的血紅蛋白抗原與抗體不匹配或者過量出血而使抗原過剩等。因靈敏度很高，某些正常人尤其是服用胃腸剌激藥物時也可出現(xiàn)陽性反應。

3.糞便隱血試驗無論用什么方法，均要求多部位多層面采集糞便標本，多次試驗，以保證檢出率，并區(qū)分出血是間斷性還是持續(xù)性。

二、臨床意義

1.糞便隱血試驗對慢性消化道出血的診斷有重要價值，該試驗陽性說明消化道有出血，如消化道潰瘍、消化道腫瘤、結腸息肉、鉤蟲病或藥物性胃粘膜損傷等都可出現(xiàn)陽性。

2.糞便隱血試驗可鑒別消化道出血病變的性質(zhì)，如消化道腫瘤時呈持續(xù)陽性，而消化道潰瘍出血多為間斷陽性。

3.糞便隱血試驗常作為消化道惡性腫瘤診斷的一個篩選指標，尤其對中老年人早期發(fā)現(xiàn)消化道惡性腫瘤有重要價值。

（責任編輯：liushengbao）

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